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中大王山峰:PμSL打印新型聚酯生物彈性體以提供組織修復(fù)新策略和新機(jī)制
中大王山峰:PμSL打印新型聚酯生物彈性體以提供組織修復(fù)新策略和新機(jī)制
更新時(shí)間:2024-01-29
點(diǎn)擊次數(shù):448
面投影微立體光刻(
P
μSL
)技術(shù)具有高分辨率、可成型復(fù)雜三維結(jié)構(gòu)及優(yōu)異表面質(zhì)量等優(yōu)點(diǎn)
。盡管
PµSL
技術(shù)在打印精度和速度方面占優(yōu)勢,但要使用具有適宜粘度的可降解樹脂制造出含有三維復(fù)雜結(jié)構(gòu)的彈性體,仍具有挑戰(zhàn)性。中山大學(xué)王山峰教授課題組先前開發(fā)了一系列可光固化聚酯如聚己內(nèi)酯(
PCL
)丙烯酸酯、
PCL
富馬酸酯和
聚富馬酸丙二醇酯
-
co
-
聚己內(nèi)酯共聚物(
PPF-
co
-PCL
),并將其制成三維結(jié)構(gòu)。然而,由于較高的結(jié)晶度和交聯(lián)密度,上述材料中用作生物彈性體上將受限
。聚三亞甲基碳酸酯(
PTMC
)是一種室溫下無定形聚合物,玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(
T
g
)較低,極限
T
g
約
-17
℃
,將對新型生物材料用于組織修復(fù)的設(shè)計(jì)策略提供重要思路。
近日,
中山大學(xué)材料科學(xué)與工程學(xué)院
王山峰教授
團(tuán)隊(duì)創(chuàng)新性地將
PTMC
與富馬酰氯經(jīng)一步縮聚反應(yīng)制備了
一種新型的可光固化聚合物:聚三亞甲基碳酸酯富馬酸酯(
P
TMCF
)
。
PTMCF
可用模具法或
PμSL
技術(shù)制備具有不同模量的可生物降解彈性體二維基底和三維支架。
PTMCF
網(wǎng)絡(luò)具有簡易合成、透明、可打印性、可生物降解性、優(yōu)異的
拉伸模量和斷裂伸長率等特點(diǎn),總體上優(yōu)于大多數(shù)已報(bào)道的彈性體。此外,
將模量與其它因素包括表面拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)和表面化學(xué)性質(zhì)解耦后,
PTMCF
可被用于研究單因素變量模量對體外人源間充質(zhì)干細(xì)胞行為以及體內(nèi)軟硬組織再生的影響。
相關(guān)成果以
“Opposite Mechanical Preference of Bone/Nerve Regeneration in 3D-printed Bioelastomeric Scaffolds/Conduits Consistently Correlated with YAP-Mediated Stem Cell Osteo/Neuro-genesis"
為題發(fā)表在
《Advanced Healthcare Materials》
上
。文章第一作者為中山大學(xué)材料科學(xué)與工程學(xué)院
2
019
級(jí)博士畢業(yè)生
成肖鵬
,主通訊作者為其導(dǎo)師
王山峰教授
。
該研究得到中國國家自然科學(xué)基金(
51973242
和
81602205
)
和
中山大學(xué)
“
百人計(jì)劃
"
啟動(dòng)經(jīng)費(fèi)的支持。
本工作通過二甘醇的雙羥基引發(fā)
TMC
單體開環(huán)聚合制備了目標(biāo)分子量分別為
500 g/mol
、
1000 g/mol
和
2000g/mol
的線性
PTMC
,隨后在縛酸劑碳酸鉀的存在下與富馬酰氯進(jìn)行縮合反應(yīng),
合成了無色的線性
P
TMCF0.5
k
、
1k
和
2k
。同一聚合物的零剪切粘度(
η
0
)隨溫度升高而降低,而
η
0
隨
PTMCF
分子量增加而增加。
PTMCF
中較高密度的碳碳雙鍵可以保證打印的流暢性。
打印流程圖以及樹脂配方如圖
1a
所示,
由于
PTMCF0.5k
的超低粘度,其樹脂中的聚合物成分可高達(dá)
90%
。這一數(shù)值要顯著高于現(xiàn)有的許多樹脂,如
聚富馬酸丙二醇酯
/
富馬酸二乙酯
(
50%
),
聚癸二酸甘油酯
丙烯酸酯
/
二甲基亞砜(
60%
)
此外,除了添加稀釋劑,采用熱輔助立體光刻技術(shù),即打印時(shí)升溫可以實(shí)現(xiàn)無溶劑打印。在這里,
PTMCF0.5k
可在
40~45
℃
下進(jìn)行打印,該打印溫度也顯著低于文獻(xiàn)中的
PTMC
三甲基丙烯酸酯(
60℃
)和
P(LLA-
co
-CL)
甲基丙烯酸酯(
80
℃
)
。
PTMCF0.5k
和
2k
的打印工作曲線如圖
1b
所示,
20 μm
層厚的臨界固化能量
E
c
分別為
58
和
90 mJ/cm
2
。為了確保層與層間的連接性以及打印結(jié)構(gòu)的完整性,由于
PTMCF0.5k
和
2k
交聯(lián)后均具有相對較低的模量,這里作者選用較高的能量來固化
PTMCF0.5k
和
2k
樹脂(
290
和
450 mJ/cm
2
,
E
c
對應(yīng)的
C
d
分別為
110 μm
和
165 μm
)
。
圖
1.
(
a
)
PµSL
技術(shù)
的打印示意圖以及流程圖;(
b
)兩種
P
TMCF
樹脂的打印工作曲線。
團(tuán)隊(duì)
優(yōu)化聚合物樹脂配方以及打印參數(shù)后采用
摩方精密
nanoArch®
S140
(精度:
10
μm
)
打印了高分辨率的三維
gyroid
結(jié)構(gòu)、單通道神經(jīng)導(dǎo)管和血管網(wǎng)絡(luò)
(圖
2a
)
。
PTMCF0.5k
和
2k gyroid
支架的壓縮模量分別為
580 ± 90
和
85 ± 13 kPa
(圖
2b
)
。
PTMCF0.5k
和
2k
神經(jīng)導(dǎo)管的法向剛度分別為
8.5 ± 1.4
和
1.6 ± 0.3 N/mm
(圖
2
c
)
。
其中,
PTMCF2k
神經(jīng)導(dǎo)管設(shè)計(jì)內(nèi)外徑和實(shí)際內(nèi)外徑分別為
1.20 mm
、
2.00 mm
和
1.10
± 0.06 mm
、
1.94 ± 0.03 mm
。導(dǎo)管的彈性及抗撕裂性對體內(nèi)植入時(shí)以及植入后損傷區(qū)域受到的彎曲、動(dòng)態(tài)擠壓以及拉伸變形至關(guān)重要。
PTMCF
神經(jīng)導(dǎo)管具有較高的柔韌性,可以抵抗彎曲、扭轉(zhuǎn)等變形而不被破壞且可回復(fù)至最初形狀
(圖
2d
)
,因此使其比先前研究的壓縮模量為
470 MPa
的硬
PEG
導(dǎo)管更容易在外科手術(shù)中縫合,并且
PTMCF
的模量與天然神經(jīng)類似(
450 kPa
)
,顯著優(yōu)于
目前常用于周圍神經(jīng)修復(fù)的可降解聚合物
,其中
包括
PGS
甲基丙烯酸酯(壓縮模量
3.2 MPa
)、
PCL
(
拉伸模量(
E
)
: 400 MPa
)、
聚乳酸
(
E
: 680 MPa
)
和
聚
-3-
羥基丁酸酯(
E
: 1160 MPa
)。此外,熱塑性聚合物如
PCL
制備的生物可吸收支架在植入前受到約束變形時(shí)容易產(chǎn)生應(yīng)力松弛甚至變形,而熱固性
PTMCF
交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)在這方面要顯著優(yōu)于熱塑性聚合物。綜上所述:
采用
PTMC
作為前驅(qū)體可以同時(shí)獲得具有低模量、優(yōu)異彈性可回復(fù)性以及可打印性的
PTMCF
網(wǎng)絡(luò)
。
圖
2.
(
a
)
G
yroid
支架、單通道神經(jīng)導(dǎo)管和血管網(wǎng)絡(luò)支架(從左至右)模型圖以及相應(yīng)的實(shí)物
S
EM
圖。(
b
)
P
TMCF
2k
神經(jīng)導(dǎo)管的柔韌性展示。(
c
)
P
TMCF
0.5k
和
2k
的
gyroid
支架的壓應(yīng)力應(yīng)變曲線,(
d
)神經(jīng)導(dǎo)管徑向壓縮力
-
位移曲線。
三種
PTMCF
的基底具有相似的表面形貌、水接觸角和蛋白吸附能力,但其模量會(huì)隨著交聯(lián)密度的
增加而增加
。因此,基于
PTMCFs
的基底
和支架可用作研究模量對干細(xì)胞行為響應(yīng)和體內(nèi)軟硬組織再生的優(yōu)異平臺(tái)。結(jié)果表明:在
E
為
90-990 kPa
范圍內(nèi),
hMSCs
細(xì)胞粘附、鋪展和增殖與模量呈正相關(guān);而
hMSCs
成骨或神經(jīng)元分化分別在
990 kPa
和
90 kPa
基底上
會(huì)
得到增強(qiáng),模量通過介導(dǎo)
YAP
轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控粘著斑蛋白形成以及后續(xù)的細(xì)胞行為。
當(dāng)支架壓縮模量處于
85-580 kPa
范圍內(nèi),大鼠股骨髁修復(fù)與支架模量呈正相關(guān);而其周圍神經(jīng)修復(fù)與支架模量呈負(fù)相關(guān)
(圖
3
)
。通過轉(zhuǎn)錄組學(xué)得到的模量介導(dǎo)周圍神經(jīng)修復(fù)潛在機(jī)制:適宜的模量可促進(jìn)細(xì)胞整合素表達(dá),激活
FAK
磷酸化并進(jìn)一步活化
Rho
家族蛋白,從而激活下游蛋白以形成
Arp2/3
復(fù)合物,促進(jìn)肌動(dòng)蛋白成核與聚合,并形成絲狀偽足、微突起和板狀偽足,促進(jìn)神經(jīng)元生長并進(jìn)一步修復(fù)周圍神經(jīng)。
本論文不僅提供了一種
優(yōu)異的可
3
D
打印生物彈性體的光固化樹脂,而且提出了不同基底模量的范圍是決定干細(xì)胞命運(yùn)以及進(jìn)一步硬
/
軟組織再生的關(guān)鍵因素之一
,并揭示了其潛在作用
的機(jī)制。
圖
3
.
大鼠(
a
)股骨缺損與(
b
)坐骨神經(jīng)損傷造模與修復(fù)時(shí)間點(diǎn)及表征手段示意圖。
(
c
)
Gyroid
支架模量對大鼠股骨髁修復(fù)的影響。
(
d
)
3D
打印神經(jīng)導(dǎo)管的模量對大鼠周圍神經(jīng)再生的影響
。
上一條
微納3D打印賦能精密電子創(chuàng)新加速
下一條
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